Pesquisadores da Korea University College of Medicine desenvolveram um método de alta precisão para detectar mutações de câncer de baixa frequência em DNA tumoral circulante. A técnica, denominada MUTE-Seq, utiliza uma enzima CRISPR modificada e melhora significativamente a sensibilidade de biópsias líquidas. Os resultados foram publicados na revista Advanced Materials e reconhecidos como capa da edição.
Biópsias líquidas são consideradas uma ferramenta promissora para a detecção precoce de câncer e o monitoramento do tratamento, mas enfrentam limitações quando o DNA de origem tumoral está presente em quantidades extremamente pequenas no sangue. A equipe liderada pelo Professor Junseok W. Hur desenvolveu o MUTE-Seq para resolver esse problema. O cerne do método é a enzima CRISPR projetada FnCas9-AF2, que detecta diferenças de base única com alta precisão e quase nenhuma atividade off-target.
A enzima cliva seletivamente o DNA do tipo selvagem, enriquecendo as sequências mutadas antes do sequenciamento. Isso reduz o ruído de fundo e permite a detecção de mutações em frequências de alelos variantes a partir de cerca de 0,005% – um valor que muitas vezes sobrecarrega o sequenciamento convencional. Testes com sequenciamento Sanger e de nova geração mostraram um aumento do sinal de dez a sessenta vezes.
Em aplicações clínicas, o MUTE-Seq identificou doença residual mínima em pacientes com leucemia mieloide aguda através da amplificação de mutações fracas de NRAS. Em pacientes com câncer de pulmão e pâncreas, a variante multiplex melhorou a concordância entre amostras de plasma e tecido, mesmo em estágios iniciais com baixos níveis de ctDNA. Análises probit revelaram um limite de detecção de 0,034% com 50 nanogramas de DNA de entrada.
O método se integra aos fluxos de trabalho de laboratório existentes e não requer sequenciamento de profundidade ultra-cara. É adequado para detecção precoce de múltiplos cânceres, diagnósticos companheiros e monitoramento de mutações resistentes. Os resultados destacam o potencial para abordagens oncológicas mais precisas.
O estudo foi realizado em cooperação com várias instituições e ficou disponível online em 21 de agosto de 2025, com a versão impressa publicada em 27 de novembro de 2025 na Advanced Materials (Volume 37, Edição 47; DOI: 10.1002/adma.202505208).
